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尼康顯微鏡:完美的對焦系統(tǒng)(PFS)
目前在熒光蛋白技術革命驅(qū)動廣泛的相關聯(lián)的方法,包括使用的活細胞在熒光顯微鏡的各種攝像模式。在過去的幾年中,由于豐富的動態(tài)信息,它可以提供有關細胞功能的基本性質(zhì),在許多細胞生物學實驗室的活細胞成像已經(jīng)成為一個必不可少的工具。也許最有趣的生物學問題,包括那些關于增長,分化,分裂和細胞凋亡的可視化在活細胞中,最終將被回答了長期的顯微鏡使用時間推移成像技術的調(diào)查?;罴毎上瘢渲械募毎仨毐3衷谝粋€健康的
2020-09-04
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尼康顯微鏡:尼康衍射效率增強系統(tǒng)(DEES)
在尼康的A1si的共聚焦顯微鏡,熒光發(fā)射光進入探測器首先通過一個專有的衍射效率增強系統(tǒng)(簡稱DEES),分離為兩個正交的偏振光的波陣面(稱為p和s)進入的非偏振光的發(fā)光,使用偏振分光鏡。DEES系統(tǒng)的目的是為了增加光的衍射效率由光柵用于分離成不同波長的熒光發(fā)射。離開分束器后,在p-波陣面是旋轉(zhuǎn)90度(成s偏振光的波),使用棱鏡系統(tǒng)和兩個光束然后由三個可互換的光柵衍射。衍射光柵,可以精確地控制,以確
2020-09-04
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尼康顯微鏡:活細胞成像對光學系統(tǒng)和CCD的要求
在活細胞研究設計的光學顯微鏡系統(tǒng),主要考慮檢測器的靈敏度(信號與噪聲),圖像采集所需要的速度,以及標本的可行性。相對較高的光照強度和較長的曝光時間,通常采用固定的細胞和組織(如漂白是主要的考慮因素)中記錄圖像時,必須嚴格避免與活細胞。在幾乎所有的情況下,活細胞顯微代表了一種妥協(xié)之間實現(xiàn)最佳的圖像質(zhì)量和保持健康的細胞。不必要的過采樣的時間點,使細胞含量超標的照明,空間分辨率和時間分辨率的實驗,而不是
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:熒光顯微鏡優(yōu)化和故障排除
熒光顯微鏡的一個重要特點是它能夠探測到熒光的對象,有時隱隱可見,甚至非常明亮與黑暗的背景(通常是黑色)。為了優(yōu)化此功能,使用的引物在該部分將要討論的原則,圖像的亮度和分辨率必須最大化。 圖像亮度 - 優(yōu)化的圖像的亮度的最重要的方面之一是,以確保在每個連接到試樣的發(fā)色基團的適當?shù)牟ㄩL,樣品被提供用于激勵具有足夠的光能量。同樣重要的是,選擇適當?shù)膿醢鍨V光鏡,向觀察管或攝像管發(fā)射的熒光的量最大化。我們已
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:熒光的基本概念
熒光是敏感,其中創(chuàng)建的物理(例如,光的吸收),機械(摩擦),或化學機制從電子激發(fā)態(tài)的分子發(fā)光的無處不在的發(fā)光過程家族的成員。通過由紫外線或可見光的光子的分子的激發(fā)發(fā)光發(fā)電的是這樣一種現(xiàn)象稱為光致發(fā)光,正式分為兩大類,熒光和磷光,這取決于激發(fā)態(tài)的電子組態(tài)和排放路徑。熒光是一些原子和分子的屬性,在一個特定的波長吸收光,并隨后經(jīng)過短暫的時間間隔更長的波長的光發(fā)射被稱為熒光壽命。發(fā)生的方法的磷光熒光的方式
2020-09-04
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尼康顯微鏡:活細胞成像的培養(yǎng)室
標本室是一個不可或缺的關鍵分支,在活細胞成像的歷史和廣泛的設計描述系統(tǒng),提供卓越的光學性能,同時允許不同時間量要保持標本多年來已經(jīng)發(fā)布。從密封蓋玻片載玻片上,使幾乎所有的環(huán)境變量的嚴格控制到復雜的灌注室編寫的簡單的復雜程度不等,培養(yǎng)室被設計為,允許活標本觀察微創(chuàng)高分辨率。不管他們的設計,活細胞成像室必須滿足各種要求,才能被成功地應用在實驗中。應易于消毒室,實驗室環(huán)境完全隔離觀察期間盡量減少暴露在污
2020-09-04
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徠卡顯微鏡的景深,如何形成清晰的圖像
顯微鏡,景深常常被看作是一個經(jīng)驗參數(shù)。在實踐中,它是由數(shù)值孔徑之間的相關性,分辨率和放大倍率。為了獲得最佳的視覺印象,現(xiàn)代顯微鏡的調(diào)整設施的生產(chǎn)領域和分辨率之間的最佳平衡深度 - 兩個參數(shù),這在理論上呈負相關。視覺景深的實用價值在DIN / ISO標準中,字段的對象側(cè)上的深度被定義為“物體面的兩側(cè)上的空間內(nèi)的軸向深度,可以移動對象圖像中沒有檢測到損失銳度,而的圖像平面的位置和物鏡維持“。但是,標準
2020-09-04
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奧林巴斯顯微鏡:霍夫曼調(diào)制對比的結(jié)構(gòu)
霍夫曼調(diào)制對比系統(tǒng),旨在提高可見度和對比度染色的和有生命的物質(zhì),通過檢測光梯度(或斜坡),并把它們轉(zhuǎn)換成光強度的變化。羅伯特·霍夫曼博士在1975年發(fā)明了這種技術,并采用了幾個配件,已經(jīng)適應了一些商業(yè)顯微鏡。霍夫曼調(diào)制對比度的基本顯微鏡的配置在圖1中示出。一種光振幅空間濾波器,被稱為“ 調(diào)制”的霍夫曼,被插入一個消色差透鏡或平場消色差物鏡的后焦平面上(雖然也可以用于更高的修正)。通過本系統(tǒng)的光強度
2020-09-04