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尼康顯微鏡:活細(xì)胞成像的培養(yǎng)室
標(biāo)本室是一個(gè)不可或缺的關(guān)鍵分支,在活細(xì)胞成像的歷史和廣泛的設(shè)計(jì)描述系統(tǒng),提供卓越的光學(xué)性能,同時(shí)允許不同時(shí)間量要保持標(biāo)本多年來已經(jīng)發(fā)布。從密封蓋玻片載玻片上,使幾乎所有的環(huán)境變量的嚴(yán)格控制到復(fù)雜的灌注室編寫的簡單的復(fù)雜程度不等,培養(yǎng)室被設(shè)計(jì)為,允許活標(biāo)本觀察微創(chuàng)高分辨率。不管他們的設(shè)計(jì),活細(xì)胞成像室必須滿足各種要求,才能被成功地應(yīng)用在實(shí)驗(yàn)中。應(yīng)易于消毒室,實(shí)驗(yàn)室環(huán)境完全隔離觀察期間盡量減少暴露在污
2020-09-04
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尼康顯微鏡:熒光激發(fā)塊的分類
落射熒光的干擾和吸收濾色鏡組合被安置在濾色鏡立方體(或光學(xué)塊),并包括激發(fā)濾光片,二色性分束器(通常稱為反光鏡),和光柵(或發(fā)射)的濾色鏡,如在圖1中示出(一)。使用本指南中選擇適當(dāng)?shù)臑V色鏡設(shè)置為廣角熒光顯微鏡調(diào)查所用的發(fā)色團(tuán)的激發(fā)和發(fā)射光譜特性相匹配。作為一個(gè)例子,圖1(b)給出一個(gè)典型的高性能帶通發(fā)射藍(lán)光激發(fā)濾色鏡組合的光譜。尼康熒光濾光器組合中所提供窄,中,寬的通帶激發(fā)版本與相應(yīng)的發(fā)射濾色鏡
2020-09-04
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尼康顯微鏡:電動(dòng)顯微鏡的結(jié)構(gòu)
電動(dòng)顯微鏡部件及配件啟用研究者活細(xì)胞圖像采集自動(dòng)化,范圍從毫秒到幾十或數(shù)百分鐘的時(shí)間刻度間隔時(shí)間推移實(shí)驗(yàn)是特別有用的??梢约友b各種各樣的售后輔助部件,如機(jī)電遮光器,電動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)盤,微處理器控制的濾波器切換(濾光輪),電動(dòng)載物臺(tái),和軸向聚焦控制機(jī)制的研究級顯微鏡和交互控制由一個(gè)同伴工作站計(jì)算機(jī)使用市售圖像采集軟件包。然而,應(yīng)該注意的是,組裝一個(gè)完全自動(dòng)化的和優(yōu)化的多維光學(xué)成像系統(tǒng)是一個(gè)非常復(fù)雜的任務(wù)。
2020-09-04
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尼康顯微鏡:熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)
由有機(jī)和無機(jī)樣品的光的吸收,隨后再輻射通常是既定的物理現(xiàn)象作為熒光或磷光的結(jié)果。通過光的發(fā)射熒光過程幾乎是同時(shí)地吸收的激發(fā)光的光子的吸收和發(fā)射,取值范圍通常小于一微秒的持續(xù)時(shí)間相對較短的時(shí)間之間的延遲。當(dāng)發(fā)射仍然存在更長的時(shí)間后已經(jīng)熄滅的激發(fā)光,該現(xiàn)象被稱為磷光。首先描述英國科學(xué)家喬治爵士G.斯托克斯于1852年,是負(fù)責(zé)這一術(shù)語時(shí),他觀察到的礦物螢石發(fā)出紅光,當(dāng)它被照亮的紫外線激發(fā)熒光。斯托克斯指
2020-09-04
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尼康顯微鏡:水浸物鏡的結(jié)構(gòu)
薄切固定的組織切片和活細(xì)胞附著到玻璃基板上的微觀調(diào)查,定期制作精湛的高清晰度圖像時(shí),用人的計(jì)劃復(fù)消色差透鏡或螢石物鏡的具有高數(shù)值孔徑。然而,目前的生物研究的顯著量的涉及到生物體組織內(nèi),其中重要的事件可能會(huì)發(fā)生內(nèi)的檢體的深部,遠(yuǎn)離玻璃蓋的細(xì)胞動(dòng)力學(xué)調(diào)查。嘗試細(xì)胞的細(xì)節(jié)圖像,并與傳統(tǒng)的油浸技術(shù)從標(biāo)本玻璃蓋千分尺距離活動(dòng)經(jīng)常遭受的文物,包括嚴(yán)重的光學(xué)像差(球形)。作為液浸介質(zhì)中,使用水代替油,是一種有效
2020-09-04
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尼康顯微鏡:在光學(xué)顯微鏡上的創(chuàng)新
所有的科學(xué)工具,有可能沒有更多的思考和勞動(dòng)投入比光鏡下改善。它在過去的幾個(gè)世紀(jì)的發(fā)展,推動(dòng)了科學(xué)家們希望較小,較暗,(圖1)和組織比以往任何時(shí)候都更深處的現(xiàn)象,觀察和測量。今天的改進(jìn)的顯微鏡所產(chǎn)生的圖像的一個(gè)例子,提出如圖1所示,其示出了數(shù)字方式捕獲的多色一個(gè)Eclipse E600顯微鏡使用CFI60 40X的熒光物鏡和尼康的新的地塞米松1200數(shù)碼相機(jī)拍攝的組織培養(yǎng)細(xì)胞的熒光圖像。一個(gè)世紀(jì)前,
2020-09-04
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尼康顯微鏡:鏡頭管鏡焦距是多少?
管透鏡的焦距增加,到中間像平面的距離也增加,這將導(dǎo)致在一個(gè)延長了的管的長度。管長度200毫米和250毫米之間被認(rèn)為是最優(yōu)的,因?yàn)楦L的焦段會(huì)產(chǎn)生較小的離軸角對角的光線,降低了系統(tǒng)的文物。管的長度越長,也增加了系統(tǒng)的靈活性方面設(shè)計(jì)配套部件。 較長的管鏡頭焦距的優(yōu)勢變得明顯時(shí),比較系統(tǒng)的焦距范圍在160毫米和250毫米之間。教程初始化時(shí),焦距滑塊的值設(shè)置為200毫米,客觀出瞳直徑等于17毫米。焦距滑
2020-09-04
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尼康顯微鏡:熒光蛋白的成像參數(shù)
迄今發(fā)現(xiàn)的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當(dāng)廣泛,并已成功地應(yīng)用在幾乎每一個(gè)生物學(xué)科從微生物系統(tǒng)生理學(xué)。這些獨(dú)特的探頭已經(jīng)證明是非常有用的記者在培養(yǎng)細(xì)胞和整個(gè)動(dòng)物的基因表達(dá)研究。熒光蛋白在活細(xì)胞中,最常用的跟蹤本地化和動(dòng)態(tài)的蛋白質(zhì),細(xì)胞器,和其他細(xì)胞區(qū)室,以及細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運(yùn)輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術(shù),其中包括寬視場,共聚焦和多光子顯微鏡,熒光蛋白的定量成像曝光細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的復(fù)雜性,提供了一個(gè)
2020-09-04