一． 顯微攝影的基礎(chǔ)知識(shí)

1． 顯微攝影裝置的放大倍率
照片的放大倍率，決定于照相目鏡的型號(hào)和顯微攝影裝置的投影長(zhǎng)度。如前所述，目前光學(xué)顯微鏡的光路系統(tǒng)是*無(wú)限遠(yuǎn)光學(xué)校正系統(tǒng)，與以前的有限遠(yuǎn)光學(xué)校正系統(tǒng)有了很大的改進(jìn)。所以兩種系統(tǒng)的照片放大倍率計(jì)算方法不同。
(1) 有限遠(yuǎn)光學(xué)校正系統(tǒng)：　照片總放大倍率=物鏡放大倍率X照相目鏡放大倍率（沒(méi)有中間附件時(shí)）或 照片總放大倍率=物鏡放大倍率X照相目鏡放大倍率X中間附件系數(shù)（連接有中間附件時(shí)）。
(2) *無(wú)限遠(yuǎn)光學(xué)校正系統(tǒng)：　照片總放大倍率=物鏡放大倍率X照相目鏡放大倍率（中間附件不影響放大倍率）。
(3) 大版照相：照片總放大倍率=物鏡放大倍率X照相目鏡放大倍率X 3。
照片的總放大倍率是指底片上圖象的放大倍率，而不是指底片沖洗到相紙后的放大倍率。
2． 物鏡與目鏡的不同組合，得到的分辨率不同
即使照片的總放大倍率相同，它的分辨率是根據(jù)物鏡、目鏡的不同組合而不同的。在顯微攝影時(shí)應(yīng)盡量使用低倍照相目鏡與高倍物鏡組合，這樣能改進(jìn)底片平面象的分辨率。
3． 標(biāo)本畫(huà)面的構(gòu)圖
顯微攝影時(shí)，視場(chǎng)中的標(biāo)本往往不適合攝影構(gòu)圖，克服這個(gè)問(wèn)題的辦法是轉(zhuǎn)動(dòng)照相機(jī)，以使標(biāo)本成比例得適合構(gòu)圖的要求。但這時(shí)要進(jìn)行操作顯微鏡來(lái)適合攝影構(gòu)圖就更困難了。一般人們樂(lè)用的方法是轉(zhuǎn)動(dòng)載物臺(tái)，將標(biāo)本調(diào)到畫(huà)幅理想的構(gòu)圖中。

二． 顯微攝影技術(shù)
1． 工作前的準(zhǔn)備
(1) 光路系統(tǒng)的清潔　　顯微攝影必須保證光路系統(tǒng)的清潔，任何光學(xué)部件有了污垢及灰塵，均會(huì)影響照片的質(zhì)量。物鏡、目鏡及聚光鏡等部件，如污垢長(zhǎng)期得不到清理，還會(huì)引起霉菌的生長(zhǎng)，致使不能應(yīng)用。各部件在擦拭時(shí)，只能清理表面，而不應(yīng)任意拆卸。
(2) 光軸中心的調(diào)整　　顯微攝影時(shí)光軸中心的調(diào)整是*不可忽視的，否則拍出的圖象，各部分的感光不勻。關(guān)于調(diào)整的方法前已述及，這里不予重復(fù)。
(3) 其它準(zhǔn)備工作　　檢查鏡體與照相系統(tǒng)的安裝是否正確；根據(jù)被檢物體的情況選用何種感光片；如為半自動(dòng)和全自動(dòng)照相系統(tǒng)，需調(diào)節(jié)好相應(yīng)的按鈕。拍攝前需用觀察目鏡觀察，先調(diào)好兩眼的瞳距，使兩個(gè)視場(chǎng)的象合而為一，再調(diào)節(jié)好兩眼的屈光度以適應(yīng)觀察者的視力。
2． 視場(chǎng)光闌與孔徑光闌的應(yīng)用
視場(chǎng)光闌的作用前已述及， 在觀察時(shí)根據(jù)物鏡的倍率不同視場(chǎng)光闌開(kāi)大或縮小而給予相應(yīng)的光束面積，以達(dá)到鏡檢的優(yōu)良效果。在顯微攝影時(shí)它起著增加和減弱影象反差的作用。當(dāng)視場(chǎng)光闌開(kāi)大到一定程度時(shí)，照射到被攝物體上的光，即會(huì)產(chǎn)生反射與不規(guī)則的散射，造成影象反差的損失；當(dāng)視場(chǎng)光闌收縮到取景框邊緣的外方時(shí)，圖象的反差就得到改善；視場(chǎng)光闌過(guò)度的收縮接近取景框，則圖象的四角部分將被切去。因此，在顯微攝影時(shí)，視場(chǎng)光闌的應(yīng)用是重要的一個(gè)因素，應(yīng)開(kāi)啟到比取景框稍大的位置。
3． 人眼屈光度的校正
鏡檢時(shí)，每人眼睛的屈光度不盡都一致，總是存在著一定的差別。當(dāng)甲看清視場(chǎng)中的圖象后，乙來(lái)觀察時(shí)就不一定清晰，這是由于兩人眼睛的屈光度有所不同而造成的，這一差別很易解決，只要調(diào)節(jié)一下微調(diào)焦旋鈕就很容易使圖象清晰。但是在顯微攝影時(shí)，用這種方法是不能解決的，因?yàn)樯鲜鍪峭ㄟ^(guò)改變工作距離的長(zhǎng)短來(lái)補(bǔ)償兩人的屈光度；而顯微攝影則必須使物鏡處于它本身的工作距離處，使成象清晰地落在感光片的平面處，才能使感光片得到清晰的圖象。往往有這樣的經(jīng)驗(yàn)，在視場(chǎng)中觀察到的圖象很滿意，可拍攝出來(lái)的底片則模糊不清，就是這個(gè)原因。
顯微攝影的調(diào)焦方法，必須利用取景側(cè)目鏡（聚焦望遠(yuǎn)鏡）或取景目鏡，首*行屈光度的校正，即旋轉(zhuǎn)取景側(cè)目鏡或取景目鏡上的圓環(huán)，使取景框中的雙十字線達(dá)到*清晰的程度，這時(shí)再進(jìn)行調(diào)焦使圖象清晰，便可進(jìn)行曝光。但應(yīng)指出，應(yīng)用同一只眼睛調(diào)節(jié)，不然兩眼之間也會(huì)存在屈光度的差異。在調(diào)節(jié)雙十字線時(shí)，應(yīng)盡快予以調(diào)整，否則長(zhǎng)時(shí)間的調(diào)整，人眼將產(chǎn)生適應(yīng)性，則不易調(diào)得準(zhǔn)確，如遇此情況，可遠(yuǎn)眺前方稍待一段時(shí)間后再進(jìn)行調(diào)節(jié)。
在使用4X以下物鏡時(shí)，由于焦深較長(zhǎng)，只用取景目鏡還會(huì)發(fā)生調(diào)焦的誤差，這時(shí)可利用“聚焦放大鏡”來(lái)克服誤差。其方法是將聚焦放大鏡放在取景側(cè)目鏡或取景目鏡上，擰緊固定螺釘，再旋轉(zhuǎn)該鏡筒上的圓環(huán)，看清雙十字線后物象是否同時(shí)清晰，如不清晰，再進(jìn)行調(diào)節(jié)。在使用10X和20X物鏡時(shí)，當(dāng)雙十字線與圖象同時(shí)清晰后，用眼環(huán)視一下，看雙十字線與圖象是否有移動(dòng)現(xiàn)象，如果圖象不移動(dòng)，則說(shuō)明焦點(diǎn)已對(duì)準(zhǔn)；如有移動(dòng)，需用微調(diào)重新調(diào)節(jié)。
4． 曝光的補(bǔ)償